Иммуноферментный анализ в лабораторных биохимических исследованиях

Введение…………………………………………………………………………...3
Глава 1. Общая характеристика иммуноферментного анализа…………………5
1.1 Краткая характеристика и принцип ИФА……………………………………5
1.2 Классификация ИФА………………………………………………………….6
1.3 Характеристика компонентов, используемых в ИФА………………………7
Глава 2. Варианты постановки ИФА……………………………………………13
2.1 Прямой ИФА…………………………………………………………………14
2.2 Непрямой ИФА………………………………………………………………15
2.3 «Сэндвич» ……………………………………………………………………16
2.4 Конкурентный ИФА…………………………………………………………17
2.5 Ингибиторный ИФА…………………………………………………………18
2.6 Метод иммуноферментных пятен (ELISPOT)……………………………...19
Глава 3. Практическое применение ИФА в лабораторных биохимических исследованиях……………………………..……………………………………..23
Заключение……………………………………………………………………….29
Список использованной литературы……………………………………………31
Приложения……………………………………………………………………...32

Весь текст будет доступен после покупки

Методы иммунного анализа широко вошли в медицинскую практику. Во всех областях современной медицины используется иммунный анализ, преимущественно, с диагностической и аналитической целями. Особенно важно, что они дают возможность идентифицировать биологические компоненты (гормоны, ферменты, нейропептиды, продукты иммунной системы, антигены и т.д.) в низких и очень низких концентрациях. Все продукты, против которых возможно получение антител, выявляются этими методами.
В последнее время во многих клинических лабораториях, санитарно-эпидемиологических станциях, станциях переливания крови, ветеринарных учреждениях успешно используют иммуноферментный анализ (ИФА). Он становится повседневным методом обнаружения специфических антигенов и антител в биологических жидкостях.
Развитие ИФА связано с поиском более простого и высокочувствительного способа улавливания минимальных количеств антигенов различного происхождения и антител к ним. Явные преимущества этого метода, к которым относится простота выполнения, доступность и высокая стабильность реагентов, легкость методов визуальной и приборной регистрации, быстрота и возможность автоматизации для проведения массовых анализов, обеспечили его прочное положение в клинической биохимии, при диагностике заболеваний растений, животных и человека, а также в научных исследованиях.
В настоящее время опубликовано значительное количество работ, свидетельствующих о перспективности использования иммуноферментных реакций в лабораторной диагностике практически всех известных на сегодняшний день опасных инфекционных заболеваний. Например, имеются многочисленные сообщения, указывающие на высокую эффективность ИФА при обнаружении и идентификации бактерий чумы, сибирской язвы, бруцеллёза, туляремии, холеры, сапа, мелиоидоза. При этом отмечается пригодность данного метода не только для тестирования чистых микробных культур, но и образцов материалов, отбираемых от больных или погибших людей и животных, а также из объектов окружающей среды.
Целью данной курсовой работы являлось углубленное изучение иммуноферментного анализа в лабораторных биохимических исследования.
Задачи исследования:
1. Изучить принцип иммуноферментного анализа.
2. Рассмотреть классификацию ИФА.
3. Дать характеристику компонентов, используемых в ИФА.
4. Изучить варианты постановки ИФА.
5. Рассмотреть практическое применение ИФА в лабораторных биохимических исследованиях.
Методы: изучение научной литературы по избранной теме, ознакомление с различными подходами и точками зрения.

Весь текст будет доступен после покупки

ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА
1.1 КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ПРИНЦИП ИФА
ИФА появился в середине 60-х годов и первоначально был разработан как метод для идентификации антигена в гистологическом препарате, а также для визуализации линий преципитации в тесте иммунодифузии и иммуноэлектрофореза, а затем стал использоваться для количественного определения антигенов и антител в биологических жидкостях.
Метод основан на специфическом связывании антитела с антигеном, при этом один из компонентов конъюгирован с ферментом, в результате реакции с соответствующим хромогенным субстратом образовывается окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически. Открытие возможности иммобилизации антигена и антитела на различных носителях с сохранением их связывающей активности позволило расширить использование ИФА в различных областях биологии и медицины.
Теоретически ИФА основывается на данных современной иммунохимии и химической энзимологии, знании физико-химических закономерностей реакции антиген-антитело, а также на главных принципах аналитической химии. Чувствительность ИФА и время его проведения определяется несколькими основными факторами: кинетическими, термодинамическими характеристиками реакции антиген-антитело, соотношением реагентов, активностью фермента и разрешающей способностью методов его детекции. В общем виде реакция антиген-антитело может быть описана простой схемой:
Разнообразие объектов исследования от низкомолекулярных соединений до вирусов и бактерий, а также необычайно широкий круг задач, связанных с многообразием условий применения ИФА, обусловливают разработку чрезвычайно большого количество вариантов этого метода.

Весь текст будет доступен после покупки

1. Галактионов В.Г. Иммунология. Издательство Московского университета, 1998 г. – 480 с.
2. Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. Медицинское информационное агентство, 2009 г. – 744 с.
3. Кишкун А.А. Современные технологии повышения качества клинической лабораторной диагностики. — М.: РАМЛД, 2005. – 528 с.
4. Кондратьева И.А. Практикум по иммунологии. Учебное пособие для ВУЗов. Академия, 2004 г. – 272 с.
5. Лефковитс И., Пернис Б. Иммунологические методы исследования. Мир, 1988 г. – 348 с.
6. Ройт А., Бростофф Д., Мейл Д. Иммунология. Мир, 2000 г. – 328 с.
7. Самойленков П.В. Принципы иммуноферментного анализа, основные виды ИФА, применение в диагностике. — Москва, 2009, РГМУ. – 690 с.

Весь текст будет доступен после покупки