ИССЛЕДОВАНИЕ ПЕПТИДА ГЛУТАТИОН МЕТОДОМ СПЕКТРОСКОПИИ ЯДЕРНОГО МАГНИТНОГО РЕЗОНАНСА

ВВЕДЕНИЕ ........................................................................................................3
ГЛАВА 1. Теоретическая часть.........................................................................5
1.1. ЯМР: ядерный магнитный резонанс……………………………….......5
1.2. Магнитные свойства ядер………………………………………………5
1.3. Химический сдвиг………………………………………………………7
1.4. Мультиплетность……………………………………………………….10
1.4 Интенсивность сигналов и интегрирование...........................................11
1.5.1 TOCSY………………………………………………………………...…12
1.5.2 HSQC……………………………………………………………………..13
1.5.3 HMBC……………………………………………………………………14
ГЛАВА 2. Глутатион (GSH). Общие сведения…………….………………..15
ГЛАВА 3. Экспериментальная часть………………………………………...17
Заключение……………………………………...……………………..............27
Список литературы……………………………………………………………28
Приложение…………………………………………………………………....29

Весь текст будет доступен после покупки

Глутатион – линейный трипептид, состав которого представлен аминокислотной последовательностью γ-Glu-Cys-Gly, существующий в двух основных стабильных формах: восстановленной (GSH) и окисленной (GSSG). В цистеинильной части молекулы присутствует сульфгидрильная (–SH) группа, которая объясняет его сильный электронодонорный характер. Поскольку молекула утрачивает электроны, она окисляется, и две такие молекулы связываются посредством дисульфидного мостика, тем самым образуют дисульфид глутатиона (GSSG). SH-группы остатков цистеина весьма значимы для функционирования ферментов и процессов, лежащих в основе ответов на факторы окружающей среды и внутриклеточной передачи информации.
Данный пептид играет важнейшую роль в клеточном обмене, участвуя в поддержании окислительно-восстановительного потенциала. Также GSH выполняет антиоксидантные функции. Возрастные изменения, стимуляция иммунных реакций, развитие острых и хронических заболеваний ассоциированы с синтезом глутатиона. В частности, почти все основные болезни человека сопровождаются вариабельностью уровня глутатиона и окислительного статуса в клетках.
Спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) – один из основных методов физико-химического анализа, используемый для однозначной идентификации структуры молекул, выявления идентичности, концентрации, поведения молекул в образцах, исследования межмолекулярных взаимодействий в растворах и полимерных цепочках.
Трифторэтанол (TFE) — органическое соединение с формулой C2H3F3O. Это бесцветная, смешиваемая с водой, жидкость с запахом, напоминающим запах этанола.TFE образует устойчивые комплексы с рядом гетероциклических соединений, как следствие сильных водородных связей.
В биологии TFE использовано в качестве сорастворителя в исследованиях сворачивания белков с помощью спектроскопии ЯМР: этот растворитель может эффективно растворить как пептиды, так и белки. В зависимости от его концентрации TFE может сильно влиять на трехмерную структуру белков.

Целью данной работы является исследование глутатиона в водном растворе с добавлением трифторэтанола методом спектроскопии ядерного магнитного резонанса.
В связи с этим ставились следующие задачи:
1. Регистрация и анализ ЯМР-спектров глутатиона в водном растворе
2. Регистрация и анализ ЯМР-спектров глутатиона в водном растворе с добавлением трифторэтанола.
3. Оценить влияние трифторэтанола на окислительно-восстановительный процесс глутатиона.
 

Весь текст будет доступен после покупки

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
1. Основы ядерной магнитной спектроскопии
1.1 ЯМР: ядерный магнитный резонанс
Метод ЯМР основан на изучении электромагнитного поля, образующегося в результате взаимодействия магнитного момента ядер водорода с внешним магнитным полем (МП).
ЯМР – это резонансное поглощение или излучение электромагнитной энергии веществом, содержащим ядра с ненулевыми спинами во внешнем магнитном поле на резонансной частоте [1]. Обусловлено это переориентацией магнитных моментов ядер.
Одной из направлений ЯМР спектроскопии — это структурные исследования. ЯМР позволяет определять пространственные структуры молекул, например, структуры белков. ЯМР-релаксация дает возможность изучать подвижность молекул, различать отдельные компоненты смесей по их подвижности. В химии и фармакологии ЯМР спектроскопия является важным методом для установления правильности синтезированного препарата. Так же явление ЯМР нашло применение в медицине в виде магнитно-резонансной томографии (МРТ), которая является методом визуализации для клинической диагностики.

Весь текст будет доступен после покупки

1. Блюмих, Б. Основы ЯМР / Б. Блюмих; пер. с англ. Н. Е. Агаповой. – М: Техносфера, 2007. – 152 с.
2. Гюнтер Х. Ведение в курс спектроскопии ЯМР/ Х.Гюнтер; пер. с англ. д-ра хим. наук Ю. А. Устынюка и д-ра хим.наук H. M. Сергеева – Москва: «Мир» 1984. – 478 с.
3. Сергеев, Н. М. Спектроскопия ЯМР (для химиков–органиков) / Н. М. Сергеев. –– М.: Издательство Моск. университета., 1981. –– 279 с.
4. Воловенко Ю.М., Карцев В.Г., Комаров И.В. Спектроскопия ядерного магнитного резонанса для химиков, 2011 – 704 с.
5. Дероум Э. Современные методы ЯМР для химических исследований: Пер. с англ.-М.: Мир, 1992.-403 с ,
6. Rezeda A. Akhmadishinaa , Elena V. Kuznetsovaa . Glutathione salts of O,O-diorganyl dithiophosphoric acids: Synthesis and study as redox modulating and antiproliferative compounds, 2017.
7. Калинина Е. В., Чернов Н. Н., Новичкова М. Д. Роль глутатиона, глутатионтрансферазы и глутаредоксина в регуляции редокс-зависимых процессов. 2014, с. 299–348 .

Весь текст будет доступен после покупки