Определение количественного содержания белка в солиофилизированных очищенных препаратах полисахарида и Ви-антигена

Введение…………………………………………..……………………………….6
1. Обзор литературы……………………………………………………..………..7
1.1. Солиофилизированные очищенные препараты полисахарида и Ви-антигена. ……………………………………………………………………..……7
1.1.1. Брюшной тиф. Вакцина Вианвак. Производство……………….....7
1.1.2. Дизентерия. Вакцина Шигеллвак. Производство……....…..……...9
1.2. Параметры входного контроля солиофилов…………………………….10
1.2.1. Количественное содержание О-ацетильных групп………..……..10
1.2.2. Содержание нуклеиновых кислот…………………...………….…11
1.2.3. Молекулярно-массовые параметры………………..………….…..12
1.2.4. Количественное содержания белка…………………………….….13
1.2.5. Специфическая активность…………………………………….…..20
1.2.6. Пирогенность…………………………………………………….….22
1.2.7. Аномальная токсичность…………………………………………...23
1.3. Оборудование, используемое для определения белка………………….23
1.3.1. Устройство и принцип действия спектрофотометра………...…...23
Выводы………………………………………………...........................................24
2. Экспериментальная часть……………………………………………………25
2.1. Объекты исследования……………………...…………………………...25
2.2. Методы количественного определения белка……………………….…26
2.2.1. Метод Бредфорд………………………………...…………….….…26
2.2.1.1. Методика эксперимента………………………………….…27
2.2.2. Метод Лоури…………………………………………………….…..33
2.2.2.1. Методика эксперимента……………………………….…....34
2.2.3. Статистическая обработка результатов………………..…….……43
2.3. Результаты эксперимента………………...………………………….…..44
Выводы…………………………………………..………………………………59
Список литературы…………………………………………………………...…59
Примечание 1…………………………………….…………………………..…..62
Примечание 2…………………………………………………………………….64
Примечание 3………………………………………………………………….…64
Примечание 4………………………………………………………………….…65
Примечание 5……………………………………………………………….…....67

Весь текст будет доступен после покупки

Сегодня не существует определенного метода определяющего количе-ственное содержание белка и соответствующего всем требованиям для этот определения [1].
Концентрация белка в субстанциях полисахарида и Ви-антигена дает по-нимание о её чистоте. В данной работе рассмотрим самые часто используе-мые методы количественного определения белка: метод Лоури и метод Бредфорда. Помимо этого, в данной работе описаны и другие методы, с по-мощью которых определяют белок в субстанциях для приготовления вакцин Шигеллвак и Вианвак
Цель работы: определение пригодности методов Лоури и Бредфорда для анализа испытуемых субстанций.
Задачи:
• выполнить анализ субстанций «Шигеллвак» и «Вианвак» методами Лоу-ри и Бредфорда;
• провести статистическую обработку получившихся данных; сравнить методы по воспроизводимости при помощи критерия Фишера;
• сделать выводы и дать рекомендации относительно определения белка в исследуемых субстанциях методами Лоури и Бредфорда.

Весь текст будет доступен после покупки

1. Обзор литературы
1.1. Солиофилизированные очищенные препараты полисахарида и Ви-антигена
1.1.1. Сальмонелла. Вакцина Вианвак. Производство препарата
Сальмонеллы являются возбудителями брюшного тифа, паратифов А, В, С и других сальмонеллезов. Брюшной тиф известен со времен Гиппо-крата. Название болезни происходит от слова typhos, означающего “дым”, “туман”. Этим термином обозначали все лихорадочные заболевания, сопровождающиеся помрачением сознания (брюшной тиф, сыпной тиф). Классическое подробное описание брюшного тифа представил С. П. Боткин в 1868 г. [2].
Действие вакцины «Вианвак» направлено против брюшного тифа.
Данная вакцина дает возможность человеческому организму выработать иммунитет против Salmonella typhi, эффективный в течение 3 лет. Для эффективного действия достаточно одного введения. Применение вакци-ны разрешено как взрослым, так и детям с трех лет.
Прививку делают подкожно в верхнюю треть плеча. Повторяют при-вивку по истечении 3 лет.

Весь текст будет доступен после покупки

1. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 1, Моск-ва, 2018, стр. 1026-1041.
2. Н. В. Литусов, А. П. Козлов. Иллюстрационное учебное пособие. Шигеллы. Уральская государственная медицинская академия. – 2012. – 4 с.
3. Тешева А.М., Апарин П.Г, Львов В.Л. Капсульный полисахарид Salmonella enterica серовара typhi (Salmonella typhi) – Vi-антиген высокой степени очистки для серологической диагностики брюшного тифа. - 2002. –
С. 64–68.
4. Апарин П.Г., Тешева А.М., Львов В.Л. Высокоочищенные полисахаридные антигены Salmonella typhi в серологической диагностике эпидемического брюшного тифа // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2003. - № 6. - С. 56–60.
5. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 4, Москва, 2018, стр. 5264-5273.
6. Н. В. Литусов. Иллюстрационное учебное пособие. Шигеллы. Уральская государственная медицинская академия. – 2012. – 12 с.
7. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 4, Москва, 2018, стр. 5274-5281.
8. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 2, Москва, 2018, стр. 2925-2924.
9. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 2, Москва, 2018, стр. 2923-2924.
10. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 4, Москва, 2018, стр. 5264-5273.
11. XIV Государственная Фармакопея Российской Федерации, часть 2, Москва, 2018, стр. 1223-1226.
12. И.Н.Дмитревич, Г.Ф.Пругло, О.В.Фёдорова, А.А.Комиссаренков. Санкт – Петербургский государственный технологический университет растительных полимеров. Физико-химические методы анализа. Оптические методы анализы. Учебное пособие для студентов заочной формы обучения. Часть 2. – 2014. – 11 с.
13. Ю.Ю. Невмержицкая, О.А. Тимофеева. Практикум по физиологии и биохимии растений (белки и ферменты). Казанский университет. - 2012. – 23 с.

Весь текст будет доступен после покупки