РАННИЙ ПРИЕМ ПРОТЕИНОГЕННЫХ АМИНОКИСЛОТ С РАЗВЕТВЛЕННЫМ СТРОЕНИЕМ АЛИФАТИЧЕСКОЙ БОКОВОЙ ЦЕПИ СНИЖАЕТ ВЫРАЖЕННОСТЬ ЛИПИДНОГО ПОРАЖЕНИЯ АОРТАЛЬНОГО КЛАПАНА У APOE-/- МЫШЕЙ

Готовая работа не предполагает план (Содержание)

Весь текст будет доступен после покупки

Готовая работа не предполагает вступление

Весь текст будет доступен после покупки

Материалы и методы. В исследование было включено 180 ApoE-/- мышей, равномерно распределенных по полу, экспериментальным группам и времени начала вмешательства. В каждом экспериментальном блоке формировались контрольная и экспериментальная группы по 90 животных (45 самцов и 45 самок). В контрольной группе мыши получали питьевую воду без добавок, тогда как в экспериментальной группе животные перорально получали BCAA, растворённые в питьевой воде, в дозе 55 мг/сутки. Расчёт дозы осуществлялся в соответствии с рекомендациями FDA с использованием коэффициента пересчёта animal equivalent dose [3], что соответствует человеческой эквивалентной дозе 13,5 г/сутки. По завершении эксперимента животных выводили из исследования с последующим иссечением аорты и сегментом левого желудочка, содержащего АК. Сосуды зачищали от жировой ткани. Для выявления липидного поражения аорты применяли окрашивание Oil Red O: аорту обезвоживали в 85% изопропаноле, окрашивали в 1% растворе Oil Red O в течение ночи, отмывали в изопропаноле и фосфатно-солевом буфере (ФСБ). Визуализацию образцов проводили на стереомикроскопе по принципу en face. Иссечённый АК замораживали в криосреде Tissue-Tek при ?195 °C и хранили при ?80 °C до получения серийных криосрезов толщиной 6 мкм. Для оценки степени липидного поражения створок АК срезы окрашивали Oil Red O с дополнительным контрастированием гематоксилином Майера. Кальциевые отложения выявляли с использованием окрашивания 2% Alizarin Red S после фиксации образцов в 95% этаноле. Визуализацию проводили методом световой и флуоресцентной микроскопии одних и тех же полей зрения с применением соответствующего светофильтра (Fs-09). Полуколичественный анализ площади поражения выполняли в программе ImageJ, статистическую обработку – в GraphPad Prism 8. Данные представлены в виде медианы и межквартильных интервалов; различия между группами оценивали с использованием критерия Краскела–Уоллиса с поправкой Данна, при уровне значимости p<0,05. Сыворотку крови получали путём центрифугирования образцов при 3000?g в течение 10 минут. Уровень ионизированного кальция определяли с использованием ионоселективного электрода. Для оценки кальцификационной склонности сыворотки образцы подвергали пересыщению кальцием и фосфатами с последующим измерением оптической плотности при длине волны 620 нм. Склонность сыворотки к кальцификации рассчитывали как разницу между значениями оптической плотности пересыщенных и контрольных образцов. Анализ проводили в стандартизированных условиях с контролем специфичности эффекта.

Весь текст будет доступен после покупки

1. Li Z., Zhang R., Mu H., Zhang W., Zeng J., Li H., Wang S., Zhao X., Chen W., Yang R. Oral administration of branched-chain amino acids attenuates atherosclerosis by inhibiting the inflammatory response and regulating the gut microbiota in ApoE-deficient mice // Nutrients. – 2022. – Vol. 14, № 23. – P. 5065. doi.org/10.3390/nu14235065
2. McMahan C. A., Gidding S. S., Malcom G. T., Tracy R. E., Strong J. P., McGill H. C. Jr. Pathobiological determinants of atherosclerosis in youth risk scores are associated with early and advanced atherosclerosis / Pathobiological Determinants of Atherosclerosis in Youth Research Group // Pediatrics. – 2006. – Vol. 118, № 4. – P. 1447-55. doi.org/10.1542/peds.2006-0970
3. Nair A.B., Jacob S. A simple practice guide for dose conversion between animals and human // J Basic Clin Pharm. – 2016. – Vol. 7, № 2. – P. 27-31. doi.org/10.4103/0976-0105.177703
4. Strong J. P., Malcom G. T., McMahan C. A., Tracy R. E., Newman W. P. 3rd, Herderick E. E., Cornhill J. F. Prevalence and extent of atherosclerosis in adolescents and young adults: implications for prevention from the Pathobiological Determinants of Atherosclerosis in Youth Study // JAMA. – 1999. – Vol. 281, № 8. – P. 727-735. doi.org/10.1001/jama.281.8.727

Весь текст будет доступен после покупки