Сравнительный анализ методов выделения днк при молекулярно-генетической экспертизе вещественных доказательств биологического происхождения

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ 4
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Понятие, строение и свойства ДНК 7
1.2. Методы молекулярно-генетической экспертизы в криминалистике 11
1.3. Молекулярно-генетические методы исследования ДНК в экспертизе вещественных доказательств биологического происхождения 11
1.3.1. Основной метод генетического анализа при выделении ДНК: 18
1.4. Вещественные доказательства – объекты молекулярно-генетической экспертизы 21
1.4.1. Характеристика выбранного биологического объекта (следы спермы) 22
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 24
2.1. Место проведения исследования 24
2.2. Установление наличия спермы в объектах 24
2.3. Выделение ДНК из спермы 25
2.3.1. Оборудование, реактивы и реагенты для выделения ДНК методом «Chelex-100» 26
2.3.2. Этапы выделения ДНК из спермы методом «Chelex-100» 26
2.3.3. Оборудование, реактивы и реагенты для выделения ДНК методом Silica «DNA IQ System» 27
2.3.4. Этапы выделения ДНК из спермы с методом Silica «DNA IQ System» 28
2.4. Определение концентрации выделенной ДНК 29
2.5. Методы статистики и обработки полученных результатов исследования 30
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 31
3.1. Сравнение концентрации ДНК, выделенной разными методами 31
3.2. Сравнение концентрации ДНК, выделенной с объектов биологического происхождения (следы спермы) в зависимости от их вида ткани (натуральные и синтетические) 32
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 34
ВЫВОДЫ 36
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 37
ПРИЛОЖЕНИЯ 41

Весь текст будет доступен после покупки

Сложная криминальная ситуация, рост насильственных преступлений, таких как убийства и изнасилования, выводят на первый план проблему обеспечения личной безопасности, соблюдения прав и свобод граждан. Одним из аспектов этой проблемы является установление личности человека. В его решении криминалистам существенную помощь оказывает молекулярно-генетическая экспертиза. Объектами данной экспертизы являются вещественные доказательства биологического происхождения, которые все чаще и чаще обнаруживают на местах происшествия.
Таким образом, следует отметить, что большое количество исследований в области криминалистического исследования объектов биологического происхождения и продолжающиеся открытия в данном направлении, позволяющие получать всё больше значимой информации из биологических следов, делают актуальной тему данной работы.
Цель исследования.
Сравнительный анализ методов выделения ДНК при молекулярно-генетической экспертизе вещественных доказательств биологического происхождения.

Весь текст будет доступен после покупки

Дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) выступает в роли носителя генетической информации. ДНК указывает на признаки организма и представляет собой сложное высокомолекулярное соединение, состоящее из последовательности дизоксирибонуклеотидов, из которой синтезируется ДНК.
ДНК – это биополимер, мономером которого является нуклеотид.
Нуклеотиды соединены между собой ковалентно в длинные полинуклеотидные цепи. Эти цепи попарно объединяются за счет водородных связей в двойную спираль, и образуют правую спираль относительно одной и той же оси. Направление цепей в молекуле взаимно противоположное. Молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты обладает устойчивым диаметром и иными параметрами, которые не зависят от нуклеотидного состава.
Длинная цепочка молекулы ДНК построена из дезоксирибозофосфатных единиц, соединенных друг с другом фосфодиэфирными связями; к каждой дезоксирибозной единице цепи присоединено пуриновое или пиримидиновое основание.
Сахарофосфатный остов находится по периферии спирали, а азотистые основания - внутри, и их плоскости перпендикулярны оси спирали. Между азотистыми основаниями, которые располагаются друг напротив друга в противоположных цепях, появляются водородные связи: аденин (А), гуанин (Г), тимин (Т), цитозин (Ц). Аденин образует водородную связь только с тимином, а гуанин - только с цитозином. Азотистые основания имеют плоскую форму и размещаются антипараллельными парами перпендикулярно оси спирали. Так же соединяются двумя водородными связями: одна из них образуется между амино- и кетогруппами, а другая – между двумя атомами азота пурина и пиримидина соответственно. Между основаниями гуанин-цитозин (Г-Ц) существуют три водородные связи: две из них образуются между амино- и кетогруппами соответствующих оснований, а третья – между атомом азота пиримидина и водородом (аналогом у атома азота) пурина.
Более объемные пурины всегда спариваются с пиримидинами, которые имеют меньшие размеры. Это указывает на то, что расстояния между атомами дезоксирибозы в двух цепях оказываются одинаковыми для таких пар оснований, как аденин-тимин (А-Т) и гуанин-цитозин (Г-Ц), и равными 1,085 нм. Два указанных типа пар нуклеотидов, А-Т и Г-Ц, называют комплементарными основаниями. Образование пар между двумя пуринами, двумя пиримидинами или некомплементарными основаниями (А-Ц или Г-Т) слишком затруднено на том основании, что при этом не могут возникать подходящие водородные связи и, следовательно, нарушается геометрия спирали.
Геометрия двойной спирали указывает на то, что соседние нуклеотиды в цепи располагаются друг от друга на расстоянии 0,34 нм. На один виток спирали приходится 10 пар нуклеотидов и шаг спирали равен 3,4 нм (10х0,34 нм). Диаметр двойной спирали равен примерно 2,0 нм. В следствие того, что сахарофосфатный остов расположен дальше от оси спирали, чем азотистые основания, в двойной спирали находятся большой и малый желобки.

Весь текст будет доступен после покупки

1. Антонова, О. С. Эффективные методы выделения нуклеиновых кислот для проведения анализов в молекулярной биологии / О. С. Антонова, Н. А. Корнева, Ю. В. Белов [и др.] - Текст : электронный // Научное приборостроение. 2010. T. 20. - Nol. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/effektivnye-metody-vydeleniya-nukleinovyh-kislot-dlya-provedeniya-analizov-v-molekulyarnoy-biologii-obzor/viewer (дата обращения 06.05.2023).
2. Бадзюк, И. Л. Анализ современных методов извлечения ДНК из биологических объектов судебной экспертизы / И. Л. Бадзюк, Ю. Э. Голодков, Е. Ю. Ларионова - Текст : электронный // Вестник Восточно-Сибирского института МВД России. 2012. - Nol (60). - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/analiz-sovremennyh-metodov-izvlecheniya-dnk-iz-biologicheskih-obektov-sudebnoy-ekspertizy (дата обращения: 23.05.2023).
3. Бенда, Р. История успеха криминалистики в Австрии [Текст] / Р. Бенда // Переводы материалов о практике деятельности правоохранительных органов зарубежных стран. – 2009. - №44. – С. 56-59.
4. Криминалистическая техника : учебник / под ред. Ю.Н. Баранова, Т.В. Поповой - Челябинск : ГОУ ВПО ЧЮИ МВД России, 2016. - 662 с.
5. Недолужко, А. Криминалистика. Молекулярно-генетическая экспертиза / А. Недолужко. - Текст : электронный // Биомолекула. - 2020. - URL: https://biomolecula.ru/articles/kriminalistika-molekuliarno-geneticheskaia-ekspertiza (дата обращения: 17.04.2023).
6. Нельсон, Д. Основы биохимии Ленинджера : учебное пособие : в 3 томах / Д. Нельсон, М. Кокс ; под редакцией А. А. Богданова и С. Н. Кочеткова ; перевод с английского Т. П. Мосоловой [и др.]. - 3-е изд. - Москва : Лаборатория знаний, [б. г.]. - Том 1 : Основы биохимии, строение и катализ - 2017. - 749 с.

Весь текст будет доступен после покупки